Phos-tag SDS-PAGE データ集casein beta

カゼインは，ウシのミルクの主成分です。
β-casein は１分子あたり5個のセリンがリン酸化されています。

アルカリフォスファターゼによって，経時的に脱リン酸化が進みます。
その過程が，リン酸基の数が多くなるほど移動度が大きくなる
Urea-PAGE によって観察されます。

通常のSDS-PAGE でもリン酸基の数によって多少の移動度の差があり，
脱リン酸化の過程がわかります。

Mn²⁺-Phos-tag SDS-PAGE では，
処理時間３０分の時に最も多数のバンドが見られます。
リン酸化数が多いほど移動度が大きくなるという法則はなく，
リン酸化数が同じでも，移動度の差があったり，
リン酸化数が１個のものが２個のものより移動度が小さかったりします。

処理時間３０分の時に最も多くのリン酸化種が含まれると考えられますが，
このサンプルを１次元目にUrea-PAGE, 2次元目にMn²⁺-Phos-tag SDS-PAGE
を行うと，リン酸化数とMn²⁺-Phos-tag SDS-PAGEでの移動度の関係がわかります。

スポットは９個観察されました。
スポット＃２は，一つのリン酸基しか含みませんが，
５つのリン酸基を含むスポット＃９よりも移動動が小さく，
全ての中で最も移動度が小さいリン酸化種です。

スポット＃２とスポット＃３は一つのリン酸基を含みますが，
移動度が異なります。
質量分析でスポットを解析したところ，
スポット＃２はSer-50, スポット＃3は Ser-34 がリン酸化されたものでした。